■ 基本信息
別名: | pColdII |
啟動子: | CSPA |
復制子: | pBR322 |
質粒分類: | 大腸系列質粒；大腸表達質粒；pCold系列質粒 |
質粒大小: | 4392bp |
質粒標簽: | N-His |
原核抗性: | Amp |
克隆菌株: | DH5a |
培養(yǎng)條件: | 37度，37℃，有氧，LB |
表達宿主: | BL21等大腸桿菌 |
誘導方式: | IPTG或乳糖及其類似物 |
5'測序引物: | pCold-F（ACGCCATATCGCCGAAAGG） |
3'測序引物: | pCold-R（GGCAGGGATCTTAGATTCTG） |
功能簡介:
| 大腸桿菌表達空載體 |
備注: | 冷休克蛋白表達載體 |
■ 質粒屬性
質粒宿主: | 大腸桿菌 |
質粒用途: | 蛋白表達 |
片段類型: | ORF
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片段物種: | 空載體
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原核抗性: | Amp |
真核抗性: |
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熒光標記: |
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■ 質粒簡介
當培養(yǎng)的大腸桿菌的溫度充分降低，幾乎暫時停止生長大部分的蛋白表達減少，而此時一組蛋白質稱為“冷休克蛋白”被專門誘導表達。冷休克表達載體，pCold I-IV，是利用冷休克基因CSPA啟動子設計高效率蛋白質表達載體。 CSPA的啟動子的下游處，插入了lac操縱子，以便嚴格控制表達。此外，5'非翻譯區(qū)（5'UTR），翻譯增強元件（TEE），His標簽序列，Xa因子切割位點和多克隆位點（MCS）位于在CSPA啟動子的下游的。由于該產品采用了大腸桿菌的啟動子，大多數大腸桿菌菌株可被用作表達宿主。有四種類型的 pCold載體，他們的下列原件的位置稍有不同，TEE，His標簽序列和Factor XA酶切位點。
pColdII質粒是利用冷休克基因CSPA啟動子設計高效率蛋白質表達載體。在E.COLI啟動子下游處，插入了lac操縱子，以便嚴格控制表達。此外，5’非翻譯區(qū)（5’UTR），翻譯增強元件（TEE）,His標簽序列，Xa因子切割位點和多克隆位點（MCS）位于CAPS啟動子的下游。當培養(yǎng)溫度切換到低溫時，大腸桿菌暫時停止生長，大部分的大腸桿菌蛋白質表達減少，但是一類稱為冷休克蛋白的蛋白質被特異性誘導表達。
■ 質粒圖譜
■ 質粒序列
質粒序列請下載：
ZK1589 pCold II大腸表達質粒.txt
